ABSTRACT
O principal mecanismo de controle do dengue tem sido por meio da eliminação do Aedes aegypti, seu transmissor mais competente. Este mecanismo consiste, principalmente, na destruição dos criadouros potenciais, na educação sanitária e no uso de inseticidas sintéticos. Estes inseticidas apresentam eficiência, mas são altamente tóxicos aos vertebrados e ao meio ambiente. Com o aparecimento da resistência dos mosquitos a essas substâncias, abre-se uma oportunidade aos inseticidas de origem botânica. Neste estudo, apresentam-se os mecanismos da atividade larvicida do ácido 3-Beta-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-oico, extraído da planta medicinal Copaifera reticulata Ducke (Leguminosae), sobre larvas de terceiro estádio de Ae. aegypti. As larvas foram submetidas a uma solução do ácido a 9ppm, por até 24 horas. Aquelas que atingiram estado letárgico foram coletadas e fixadas em paraformaldeído a 4 por cento, em tampão cacodilato de sódio 0.1M pH 7.2, incluídas em resina, e as lâminas, coradas pela técnica de hematoxilina-eosina e analisadas por microscopia de luz. O ácido causou a morte das larvas pela destruição celular do intestino médio, por meio de vacuolização citoplasmática, hipertrofia celular e nuclear, degeneração do bordo em escova, formação vesicular apical com liberação de conteúdo citoplasmático, estratificação do epitélio e dobras na matriz peritrófica.
The main mechanism of control of dengue has been through the fight against Aedes aegypti, the most competent vector. The fight primarily consists of elimination of its potential breeding sites, health education and use of synthetic insecticides. These insecticides are effective but are highly toxic to vertebrates and the environment. With the emergence of resistance of mosquitoes to them, insecticides of botanical origin are being explored. This study looks at the larvicidal activity of a solution of a solution of 3-Beta-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico acid extracted from the medicinal plant Copaifera reticulata Ducke (Leguminosae) on the 3rd stage larvae of Ae. aegypti. Larvae were subjected to 9 ppm acid for up to 24 h. Those that reached lethargic state were collected and fixed in 4 percent paraformaldhyde in 0.1 M sodium cacodilate buffer, pH 7.2, included in resin and the slides stained with the hematoxylin-eosin technique and examined by light microscopy. This acid caused the death of the Ae. aegypti larvae by cell destruction in the midgut, by the high cytoplasmic vacuolation, cell and nuclear hypertrophy, degeneration of the brush edge, apical vesicular formation with release of cytoplasmic contents of cells, stratification of the epithelium and folds in the peritrophic matrix.
Subject(s)
Aedes , Dengue , Larvicides , Plants, Medicinal , Yellow FeverABSTRACT
O dengue é uma doença viral transmitida por Aedes aegypti em mais de 100 países na faixa intertropical do mundo e, até o momento, as principais formas de controle são as ações antivetoriais. Neste trabalho, são apresentadas as alterações ultraestruturais provocadas pelo diflubenzuron (DFB) nas larvas de Ae. aegypti. Os experimentos foram realizados com larvas de terceiro estádio de Ae. aegypti com DFB nas concentrações de 0,1 e de 1miug/mL. Após 24 horas de exposição, as larvasforam coletadas, fixadas, desidratadas, emblocadas, cortadas, contrastadas com acetato de uranila a 3por cento e citrato de chumbo e analisadas em microscópio eletrônico. As alterações ultraestruturaisforam observadas na cutícula e no mesêntero dessas larvas. Por meio de microscopia de varredura, observou-se o aumento do número das cerdas, que se apresentaram mais delgadas e mais longas do que o controle e exibiram um padrão de enrolamento nos sulcos intersegmentares. As análises nomicroscópio eletrônico de transmissão revelaram que as epicutículas antigas se desprenderam quase que totalmente da nova epicutícula e não possuíam pontos de reforço comumente encontrados no controle. As células do mesêntero de larvas expostas ao DFB apresentaram um arcabouço esponjosoe nas secções ultrafinas se apresentaram danificadas e vacuolizadas, mas com a presença de vesículas de secreção e integridade mitocondrial. Este estudo mostrou que o DFB interfere no processo da ecdise e impede a liberação da cutícula velha que se acumula nos espaços intersegmentares estrangulando as porções segmentares num processo sucessivo e acumulativo, também bloqueia a muda e provoca a morte da larva. Este é o mecanismo de ação larvicida do DFB sobre Ae. aegypti,entretanto o produto age também no mesêntero destruindo as células.
Subject(s)
Aedes/ultrastructure , Pest Control, Biological , Dengue , DiflubenzuronABSTRACT
INTRODUÇÃO: Dengue é um importante problema de saúde pública, em vários países, e tem como principal vetor o Aedes aegypti, mosquito mais adaptado às áreas urbanizadas. Apresenta-se, pela primeira vez, as alterações ultraestruturais em larvas de 3º estádio, desse mosquito, causadas pelos larvicidas naturais, um diterpeno labdano, extraído de Copaifera reticulata, e uma fração rica em taninos catéquicos, extraída de Magonia pubescens, evidenciando o mecanismo de ação dessas substâncias. MÉTODOS: Os experimentos foram realizados com larvas de 3º estádio em solução de 0,9ppm, do diterpeno (3-β-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico) e de 3,7ppm, da fração majoritária de tanino catéquico de massa molecular 864Da. Obtiveram-se as substâncias através de fracionamentos cromatográficos sucessivos, identificadas por ressonância magnética nuclear de hidrogênio e espectrometria de massas. As larvas que atingiram estado letárgico foram coletadas e dissecadas e seus tubos digestórios fixados, desidratados, emblocados e polimerizados. Cortes ultrafinos foram feitos e contrastados com acetato de uranila 3 por cento e citrato de chumbo, posteriormente, levados ao microscópio eletrônico. RESULTADOS: As principais alterações ultraestruturais provocadas pelos diterpeno e tanino sobre larvas de Aedes aegypti foram vacuolização citoplasmática, desorganização e degeneração celular, mudança estrutural dos microvilos e deslocamento das células da lâmina basal. CONCLUSÕES: O diterpeno e a fração rica em taninos catéquicos provocaram a morte das larvas de Aedes aegypti através da destruição celular no intestino médio.
INTRODUCTION: Dengue is an important public health problem in many countries and its main vector Aedes aegypti, is the mosquito most adapted to urban areas. For the first time, the mechanism of action of labdane diterpenoid extracted from Copaifera reticulata and the fraction enriched of catechin tannins extracted from Magonia pubescens is demonstrated through ultrastructural alterations of Aedes aegypti larvae. METHODS: Experiments were performed using a 0.9ppm solution of diterpenoid and 3.7ppm of the fraction as the main catechin tannin of molecular mass 846Da. The compounds were obtained by thin layer chromatography and identified by nuclear magnetic resonance of hydrogen and mass spectrometry. Larvae that achieved lethargic state were collected and dissected. Next, they were contrasted with 1 percent uranyl acetate, dehydrated, embedded and polymerized. Ultrathin sections were made, mixed with 3 percent uranyl acetate and lead citrate and placed in an electron microscope. RESULTS: The main ultrastructural alterations caused by the diterpenoid and by tanins in larvae of Aedes aegypti were: cytoplasmic vacuolation, alteration of microvilli, cellular aging, cell disruption and degeneration, formation of secretion vesicles and structural changes in microvilli, irregular nuclei and displacement of cells in the basal lamina. CONCLUSIONS: The fraction containing tannins and the diterpenoid caused the death of Aedes aegypti larvae by cell destruction in the midgut.
Subject(s)
Animals , Aedes/drug effects , Diterpenes/pharmacology , Fabaceae/chemistry , Insecticides , Plant Extracts/pharmacology , Sapindaceae/chemistry , Tannins/pharmacology , Aedes/growth & development , Aedes/ultrastructure , Diterpenes/isolation & purification , Insecticides/isolation & purification , Intestines/drug effects , Intestines , Larva/drug effects , Larva/ultrastructure , Magnetic Resonance Spectroscopy , Mass Spectrometry , Tannins/isolation & purificationABSTRACT
O controle do Aedes aegypti é hoje um dos grandes problemas de saúde pública no Brasil, por ser o principal vetor do dengue e da febre amarela urbana. De origem africana, este mosquito adaptou-se muito bem às condições climáticas brasileiras e se encontra distribuído em todos os estados. Os métodos usuais de combate e controle deste mosquito têm sofrido vários questionamentos. Os inseticidas químicos atualmente utilizados têm levado ao surgimento de populações resistentes de mosquitos, a consequente elevação de sua densidade já desencadeou grandes epidemias de dengue. Substâncias inseticidas de origem botânica podem ser candidatas alternativas ao controle. Este trabalho apresenta, pela primeira vez, as alterações morfo-histológicas causadas pela atividade larvicida do tanino catéquico, extraído de Magonia pubescens, nas larvas de A. aegypti, mostrando o potencial larvicida deste composto natural. Larvas de terceiro estádio foram submetidas aotanino catéquico, a 37ppm, solubilizado em água, onde permaneceram por até 24 horas. As larvas que atingiram estado letárgico foram coletadas e fixadas em paraformaldeído a 4por cento em tampão cacodilato de sódio 0.1M pH 7.2, incluídas em resina, montadas em lâminas, coradas pelahematoxilina-eosina e analisadas por microscopia de luz. Os principais efeitos tóxicos celulares do tanino catéquico sobre larvas de A. aegypti foram: elevada vacuolização e ausência dos limites citoplasmáticos, formação vesicular apical com liberação de conteúdo citoplasmático, aumento do espaço intercelular e desprendimento de células da membrana basal.
Subject(s)
Aedes , Pest Control, Biological , Insect Control , Diptera , Sapindaceae/toxicity , Tannins/toxicityABSTRACT
Os efeitos da toxicidade do extrato bruto etanólico (e.b.e.) da casca do caule da Magonia pubescens (St. Hil.) em células do mesêntero de larvas de terceiro estádio do mosquito Aedes aegypti (L.) (Diptera: Culicidae) foram investigados por meio da microscopia eletrônica. Vários períodos de exposição ao e.b.e. foram analisados e diferentes graus de destruição foram observados de acordo com o aumento do tempo de exposição. As alterações morfológicas iniciaram-se após quatro horas de tratamento e incluíram a perda de cristais mitocondriais e o espessamento da matriz peritrófica. Com o aumento do período de exposição, evidenciaram-se novas alterações ultra-estruturais, destacando-se completa destruição de mitocôndrias, vacuolização citoplasmática, perda, redução ou rompimento das microvilosidades e alterações nucleares, o que mostrou a elevada toxicidade do e.b.e. e apontou perspectivas de seu uso no controle de larvas do A. aegypti.
Subject(s)
Aedes , Dengue/prevention & control , LarvicidesABSTRACT
O óleo-resina de Copaifera reticulata Ducke foi utilizado para verificar sua toxicidade e as alterações morfológicas estruturais provocadas em larvas de terceiro estádio de Aedes aegypti. A partir de 15 minutos de contato da larva com a solução a 30 ppm, houve diminuição em sua mobilidade e após 20 horas, destruição total ou parcial das células, elevada vacuolização citoplasmática, aumento do espaço intercelular e da liberação de secreções celulares e alterações nos nervos periféricos, nas microvilosidades, no núcleo, nucléolo e no epitélio que sofre pavimentação e estratificação. Este estudo elucida os mecanismos de ação do óleo-resina de C. reticulata sobre larvas de A. aegypti. As CL50 e CL90 foram de 8,9 e 59,4 ppm, respectivamente. Tais concentrações evidenciam o potencial larvicida da planta, ampliando as possibilidades de seu uso no controle deste mosquito.
Subject(s)
Humans , Aedes , Culicidae , Dengue/prevention & control , Fabaceae/toxicity , BrazilABSTRACT
Dengue é hoje a arbovirose mais importante no mundo e seu controle está restrito, basicamente, ao combate ao principal vetor, o Aedes aegypti. As ações têm como foco a aplicação de inseticidas químicos sintéticos que possuem ação rápida e eficaz no combate, porém são altamente tóxicos para os mamíferos e o meio ambiente. Seu uso tem induzido ao desenvolvimento de resistênciado mosquito. Produtos naturais provenientes de plantas poderão representar alternativas às medidas de controle em razão de sua baixa toxicidade para os mamíferos e da ausência de impacto ambiental. Neste estudo, são apresentadas as alterações morfo-histológicas e a atividade larvicida do extrato bruto etanólico (e.b.e.)da casca do fruto de Sapindus saponaria sobre o A. aegypti, visando ao controle desse mosquito. Larvas de terceiro estádio foram submetidas a diferentes concentrações do e.b.e, obtido da casca do fruto de S. saponaria, previamente solubilizado em água, onde permaneceram por até 48 horas. As larvas que atingiram estado letárgico foram coletadas e fixadas em paraformaldeído, incluídas em resina, seccionadas e as lâminas coradas pela técnica de hematoxilina-eosina e analisadas por microscopia de luz. A CL99 do e.b.e. da casca do fruto de S. saponaria sobre larvas de A. aegypti foi de 134,1 ppm. Os efeitos tóxicos desse e.b.e. foram observados em concentrações subletais e as três regiões do mesêntero apresentaram várias alterações histopatológicas: destruição total ou parcial das células, alta vacuolização do citoplasma, hipersecreção das células epiteliais e pavimentação do epitélio. Essas alterações celulares evidenciam o mecanismo de ação do e.b.e. de S. saponaria sobre larvas de A. aegypti.
Subject(s)
Animals , Humans , Aedes , Dengue/prevention & control , Phytotherapy , SapindusABSTRACT
A mortalidade e as alterações morfológicas ocorridas em larvas de terceiro estádio de Aedes aegypti foram estudadas sob o efeito do inibidor da ecdise, o diflubenzuron, nas concentrações de 0,1 e 1 ppm, com a finalidade de mostrar os seus mecanismos letais. As principais alterações com o uso da microscopia de luz incluíram a presença de vacúolos citoplasmáticos e grande quantidade de secreção na superfície apical das células do mesêntero, além do espessamento da cutícula eintensa atividade celular. Observaram-se alterações no corpo gorduroso da larva, além da presença de várias cutículas. Embora estas se soltassem, às vezes, da região cefálica, a muda não era finalizada, levando a larva à morte. Vários aspectos da ecdise foram evidenciados, dentre eles, o início da muda com espaço subcuticular bem definido e a presença da epicutícula e exocutícula e a formação da nova cutícula. As larvas morreram presas a essas camadas, em períodos de 6,8 +- 0,59 e de 6,5 +- 0,99 dias, respectivamente, às soluções de 0,1 e 1 ppm. Em condições de campo, apenas a dose de 1 ppm causou 100 por cento de mortalidade, sendo que a morte não ocorre rapidamente como na intoxicação direta com inseticidas neurotóxicos.